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改编自先前公布的检测(15)的定量溶血试验。在整个生长周期中采取的文化简言之,150μL金额800μl血液组合的结合40毫升1×磷酸盐缓冲液(PBS)加500μLdefibrinated羊血(东北实验室服务,斯罗,我) ,细胞颗粒离心4分钟9000转(6,605×G)。管培养18小时,并在13000转离心除去细胞壁碎片。在清除细胞裂解液中的血红素由od415确定目前的数量作为衡量的红血细胞裂解和归到细菌细胞密度(OD600)。

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溶血素定量测定是改编自一以前发布的检测方法 (15)。简言之,150-超微量 (µ l 文化采取的整个生长周期的数额被加 800 超微量 (µ l 40 毫升 1 × 磷酸盐盐水 (PBS) 的血液混合的加 500 超微量 (µ l 菌种保存羊血 (东北实验室服务、 温思劳,ME),和细胞被用在 4 分钟的 9,000 rpm (6,605 × g) 离心法颗粒。管子被孵化 18 h,和删除用离心法在 13,000 rpm 的细胞壁碎片。目前已清除细胞是由 OD415 中血红素的量是用作血红细胞溶解的措施和规范化为细菌细胞密度 (OD600)。

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一个定量溶血素分析用试样从一个早先出版分析用试样(15)适应了。 简而言之, 150-μl相当数量文化被采取在生长周期中与800血液混合的μl结合了的40机器语言1×磷酸缓冲盐(PBS)加上μl defibrinated绵羊血液的500 (东北实验室业务, Winslow,我),并且细胞由离心法射击在9,000转每分钟(6,605 × g) 4 min。 管为18 h被孵化了,并且细胞壁残骸被离心法取消在13,000转每分钟。 相当数量heme当前在被清除的细胞lysate一样坚定由OD415使用了象红血球病势渐退措施并且正常化了到细菌细胞密度(OD600)。
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